Eliza Dushku débute le métier à 12 ans en donnant la réplique à Juliette Lewis dans That Night. L'année suivante, elle joue aux côtés d'un Leonardo DiCaprio débutant dans Blessures secrètes avec Robert De Niro et Ellen Barkin. En 1994, elle devient la fille de Arnold Schwarzenegger et Jamie Lee Curtis dans True Lies. La jeune comédienne apprend le métier auprès des plus grands, mais c'est à la télévision qu'elle doit sa popularité.

Le personnage récurrent de la Tueuse rebelle Faith qu'elle joue dans Buffy contre les vampires et Angel lui permet de se faire connaître du grand public dans de nombreux pays. Le succès aidant, elle devient la vedette de sa propre série : Tru Calling : compte à rebours.  Malheuresement, la série est annulé à la fin de la saison 2. Enfin, elle joue dans la série DollHouse créée par le créateur de Buffy contre les vampires.